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http://hdl.handle.net/10261/42956
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Título: | Análisis celular y molecular de la heterocromatina en Sciara (Díptera Sciaridae) |
Autor: | Escribá Pérez, M. Carmen CSIC | Director: | Villasante Atienza, Alfredo; Goday, Clara CSIC | Palabras clave: | Sciara díptero Insectos heterocromatina Centrómeros eliminación cromatina |
Fecha de publicación: | 2011 | Editor: | Universidad Autónoma de Madrid | Resumen: | El díptero Sciara, y en particular las especies S. coprophila y S. ocellaris,
constituyen un buen modelo experimental para analizar alteraciones programadas de la
segregación cromosómica durante el desarrollo. En ambos organismos se produce la
eliminación selectiva de uno o dos cromosomas X paternos durante las divisiones
somáticas del embrión y la no-disyunción del cromosoma X materno durante la meiosis
II masculina. Ambos procesos implican alteraciones importantes en la función
centromérica y están regulados por un mismo locus (locus CE) cuyas secuencias
específicas de DNA se desconocen todavía. En S. coprophila se ha determinado que el
locus CE reside en la heterocromatina adyacente al centrómero del cromosoma X.
En la primera parte de este trabajo de Tesis Doctoral se ha procedido a abordar, por primera vez, el estudio citológico y molecular de la heterocromatina en los
cromosomas de S. coprophila. Para ello, se ha llevado a cabo la microdisección de la
región centromérica del cromosoma politénico X y la posterior amplificación y clonaje
del DNA obtenido. La localización cromosómica de los clones seleccionados se ha
realizado mediante experimentos de hibridación “in situ” en cromosomas politénicos, mitóticos y meióticos. Este trabajo ha permitido la identificación y caracterización de dos repeticiones de la región pericentromérica del cromosoma X, un retrotransposón pericentromérico (RTE) y un satélite centromérico rico en ATs. En la segunda parte del trabajo se han explorado las modificaciones covalentes de las histonas relacionadas con la ocurrencia del fenómeno de la no-disyunción del cromosoma X materno durante la meiosis masculina. Para ello, en espermatocitos de S. coprophila y S. ocellaris, se ha estudiado mediante inmunofluorescencia los patrones de fosforilación de la histona H3 en los residuos de serina 10/28 y treonina 3/11. Los resultados han permitido demostrar que durante la meiosis II masculina el cromosoma X materno difiere del resto de cromosomas, ya que su región centromérica no está fosforilada para la histona H3. Así, se ha relacionado por primera vez, en las dos especies, la falta de fosforilación de la histona H3 en la región centromérica del cromosoma X con su inactivación funcional. Por último, se ha iniciado la caracterización de secuencias teloméricas en Sciara coprophila. Para ello, se ha microdiseccionado y microclonado la región telomérica 1A el cromosoma IV. El análisis de las secuencias obtenidas ha permitido caracterizar una secuencia telomérica específica de este telómero. |
Descripción: | Leída en la Universidad Autónoma de Madrid. Facultad de Ciencias. Departamento de Biología el 10-21-2011; 70 págs. | URI: | http://hdl.handle.net/10261/42956 |
Aparece en las colecciones: | (CIB) Tesis |
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Tesis Mª Carmen Escribá Pérez | 7,53 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
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