Estudo comparativo dos efeitos do 17-ß-estradiol, do extracto de soja e dos fitoestrogénios que o integram em culturas de células humanas

Abstract

A soja tem vindo a adquirir uma posição de destaque no mercado ocidental, ao longo dos últimos anos, com o aumento da procura por este produto vegetal. Os fitoestrogénios são importantes constituintes da soja que se ligam a receptores de estrogénio (ER), podendo exercer alguns efeitos benéficos no Homem. A acção anticarcinogénica, a diminuição de alguns sintomas associados à menopausa, e a prevenção da osteoporose e das doenças cardiovasculares são alguns dos resultados positivos já evidenciados. Os fitoestrogénios mais estudados são as isoflavonas, onde se insere a genisteína e a daidzeína. Os estudos realizados pretenderam estudar qual o efeito de diferentes concentrações dos compostos estrogénicos (extracto de soja, genisteína, daidzeína e 17-β-estradiol) em fibroblastos saudáveis da derme humana- NHDF e células epiteliais com carcinoma mamário-MCF7. Para alcançar este objectivo, optimizou-se o modelo de estudo, determinaram-se os efeitos na viabilidade celular após incubação e recuperação (ensaio de MTT), e estudou-se a capacidade de induzir a apoptose (ensaios de citometria de fluxo). Dos vários protocolos testados na optimização do modelo de estudo, foi escolhido o protocolo que se baseou na aplicação de meio de cultura completo, e que usou tempos de incubação e recuperação de 48 horas. Observou-se uma variação na viabilidade celular dependente da concentração aplicada, tendo as concentrações mais elevadas demonstrado uma diminuição estatisticamente significativa da mesma, para as linhas celulares NHDF e MCF7. Registou-se uma recuperação nas 2 linhas celulares, que foi superior nas MCF7. Os ensaios de citometria de fluxo indicaram que os compostos estudados poderiam exercer uma acção protectora sobre as células, no entanto, o número de ensaios realizados não foi suficiente para podermos tirar conclusões. Por fim, foram comparadas diluições semelhantes de 1 cápsula de extracto de soja e de um comprimido de 17-β-estradiol, aconselhados na terapia hormonal de substituição. Concluiu-se que a recomendação da administração do extracto de soja deve ser cuidadosamente avaliada, pois pode aumentar a proliferação celular em tecidos cancerígenos.

Over the past years, soy has gained a prominent position in the Western market, with the increasing demand and supply for this plant. Phytoestrogens are important constituents of soy. They bind to estrogen receptors (ER) and they are able to modify some physiological processes, with benefits for humans. The anticarcinogenic action, the reduction of some symptoms associated with menopause, and prevention of osteoporosis and cardiovascular diseases are some of the positive outcomes. The most studied phytoestrogens are isoflavones, which include genistein and daidzein. The studies conducted sought to investigate the effect of different concentrations of estrogenic compounds (a soy extract, genistein, daidzein and 17-β-estradiol) in human dermal fibroblasts from healthy subjects – NHDF – and epithelial breast carcinoma cells – MCF7. To achieve the objectives, it was necessary to optimize the model of study, to determine de effects on cells viability: after incubation and after recovery (MTT assay), and to study the capacity of the induction of apoptosis (flow cytometry assays). We tested different protocols, in the process of optimization of the model of study. The chosen protocol was based on the application of complete culture medium, and incubation and cells recovery’s time was 48 hours. We checked a variation in cells’ viability, that was concentration-dependent; the results for the highest concentration applied showed a statistically significant decrease in cells viability for the MCF7 and NHDF cell lines. Both cell lines recovered, but MCF-7 cells recovered more. The flow cytometry assays indicated that the compounds studied may exert a protective action on cells, however, the number of tests developed in our studies was not enough to draw conclusions. Finally, we compared a soybean extract (capsules) and 17-β-estradiol (tablets), used on hormone replacement therapy. We concluded that the recommendations about administering supplements or medicines based on soybean extracts must be carefully evaluated, as it may increase cell proliferation in cancer tissues.