ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΕΝΕΣΗ ΚΑΙ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΤΟΥ RAS ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΟΥ ΑΠΟ ΑΛΚΥΛΙΩΤΙΚΟΥΣ ΚΑΡΚΙΝΟΓΟΝΟΥΣ ΠΑΡΑΓΟΝΤΕΣ

Abstract

06-METHYLQUANINE, THE MAJOR PREMUTAGENIC AND PRECARCINOGENIC LESION INDUCED BY METHYLATING AGENTS, WAS INTRODUCED, BY MEANS OF SITE-DIRECTED MUTAGENESIS, INTOTHE CODONS 12 AND 13 OF THE HUMAN HA-RAS1 PROTO-ONCOGENE. THE 06MEG MUTAGENESIS WAS STUDIED IN E. COLI CELLS OF DIFFERENT REPAIR CAPACITIES: 1) O6MEG INDUCEDEXCLUSIVELY G-> A MUTATIONS, 2) THE MECHANISM OF THE METHYL- DIRECTED MISMATCHREPAIR PROTECTS, INDIRECTLY THE E. COLI CELL FROM THE O6MEG MUTAGENESIS INDIRECTLY, BECAUSE IT REPAIRS THE G:T DEMETHYLATION 3) IN ALKYLTRANSFERASE DEFICIENTE. COLI CELLS, THE O6MEG MUTAGENIC EFFICIENCY IS SIGNIFICANTLY INCREASED, THEREFORE THE ALKYLTRANSFERASE IS THE MAJOR REPAIR ENZYME OF THE LESION. HOWEVER, IN THE ABSENCE OF ALKYLTRANSFERASE AND MISMATCH REPAIR, THE MAIN EXCISION REPAIRWHICH IS PROVED TO HAVE A REMARKABLE EFFICIENCY TOWARDS O6MEG, SINCE THE MUTAGENIC EFFICIENCY NEVER REACHED HIGHER THAN 10-23%.

Η Ο6-ΜΕΘΥΛΟΓΟΥΑΝΙΝΗ, ΠΡΟΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΟΝΟΣ ΚΑΙ ΠΡΟΚΑΡΚΙΝΙΚΗ ΒΛΑΒΗ Η ΟΠΟΙΑ ΕΠΑΓΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟΥΣ ΜΕΘΥΛΙΩΤΙΚΟΥΣ ΠΑΡΑΓΟΝΤΕΣ, ΕΙΣΗΧΘΗ ΣΕ ΚΡΙΣΙΜΕΣ ΘΕΣΕΙΣ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟΥ ΠΡΩΤΟ-ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΟΥ HA-RAS1 (ΚΩΔΙΚΟΝΙΑ 12,13) ΚΑΙ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΕ Η ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΟΝΟΣ ΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΣΕ E. COLI ΚΥΤΤΑΡΑ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΗΣ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΤΙΚΗΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑΣ: 1) H O6- ΜΕΘΥΛΟΓΟΥΑΝΙΝΗ ΕΠΗΓΕ ΑΠΟΚΛΕΙΣΤΙΚΑ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ G-> A, 2) Η ΣΥΧΝΟΤΗΤΑ ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΕΝΕΣΗΣ ΣΕ ΒΑΚΤΗΡΙΑ ΕΛΑΤΤΩΜΑΤΙΚΑ ΩΣ ΠΡΟΣ ΤΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΣΗΣ ΛΑΝΘΑΣΜΕΝΩΝ ΖΕΥΓΩΝ ΒΑΣΕΩΝ ΕΙΝΑΙ ΔΙΠΛΑΣΙΑ ΤΗΣ ΣΥΧΝΟΤΗΤΑΣ ΠΟΥ ΠΑΡΑΤΗΡΕΙΤΑΙ ΣΕ ΒΑΚΤΗΡΙΑ ΑΓΡΙΟΥ ΤΥΠΟΥ, ΠΡΑΓΜΑ ΠΟΥ ΣΗΜΑΙΝΕΙ ΟΤΙ Ο ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΣΗΣ ΛΑΝΘΑΣΜΕΝΩΝ ΖΕΥΓΑΡΙΩΝ ΒΑΣΕΩΝ ΠΟΥ ΚΑΤΕΥΘΥΝΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΗ ΜΕΘΥΛΙΩΣΗ, ΣΥΝΕΙΣΦΕΡΕΙ ΕΜΜΕΣΑ ΣΤΗ ΜΕΙΩΣΗ ΤΗΣ ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΕΝΕΣΗΣ ΑΠΟ ΤΗΝ Ο6MEG. ΕΜΜΕΣΑ ΓΙΑΤΙ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΝΕΙ ΤΑ ΕΝΔΙΑΜΕΣΑ ΖΕΥΓΗ G:T ΠΟΥ ΠΡΟΚΥΠΤΟΥΝ ΑΠΟ ΤΗΝ ΑΠΟΜΕΘΥΛΙΩΣΗ ΖΕΥΓΩΝ O6MEG:T, 3) ΣΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΕΛΛΕΙΠΗ ΩΣ ΠΡΟΣ ΤΗΝ ΑΛΚΥΛΟΤΡΑΝΣΦΕΡΑΣΗ ΠΑΡΑΤΗΡΕΙΤΑΙ ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΑΥΞΗΣΗ ΤΗΣ ΜΕΤΑΛΛΑΞΟΓΕΝΕΣΗΣ, ΠΡΑΓΜΑ ΠΟΥ ΑΝΑΔΕΙΚΝΥΕΙ ΤΟ ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ ΡΟΛΟ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΣΤΗΝ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΣΗ ΤΟΥΣΥΜΠΛΟΚΟΥ (Ο6MEG). ΤΕΛΟΣ, Ο ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ ΑΦΑΙΡΕΤΙΚΗΣ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΣΗΣ ΑΠΟΔΕΙΚΝΥΕΤΑΙ ΝΑ ΕΧΕΙ ΑΞΙΟΛΟΓΗ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑ ΕΝΑΝΤΙ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΟΚΟΥ, ΥΠΟ ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΑΠΟΥΣΙΑΣΤΗΣ ΑΛΚΥΛΟΤΡΑΝΣΦΕΡΑΣΗΣ, ΚΑΙ ΤΟΥ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΥ ΕΠΙΔΙΟΡΘΩΣΗΣ ΛΑΝΘΑΣΜΕΝΩΝ ΖΕΥΓΩΝ ΒΑΣΕΩΝ.