Η κλινική σημασία της μοριακής σταδιοποίησης στον καρκίνο του παχέος εντέρου

Abstract

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common forms of cancer in regard to both incidence and mortality. For the time being surgical resection to the tumor followed by adjuvant chemotherapy remains the prominent choice for treatment.Despite surgery almost 45% of patients ultimately die of distant metastases. Staging of CRC is based on the Tumor, Node and Metastasis (TNM) staging system. TNM system apart from predicting cancer prognosis , is also widely used in the course of treatment choice.Although frequently updated the TNM system often fails to discriminate among tumors of intermediate stages or even morphologically similar tumors with different clinical behavior. Overall survival is associated with the disease stage at the time of diagnosis. Unfortunately in a large number of cases, CRC is diagnosed in advanced stages. It is obvious that early detection of disseminated disease may be of great significance, however the available methods for screening encounter several difficulties in meeting that expectation. It is therefore of great importance that new and improved diagnostic and screening methods are applied.In our study we used the multiplex RT-PCR to detect three markers (CEA, CK20 and EGFR).The employment of multiplex RT-PCR on peripheral blood samples represents an easily applied non-invasive technique for the detection of circulating tumor cells in cancer patients. Our multiplex RT-PCR-based detections of CEA, CK20 and EGFR transcripts were characterized by very good specificity. CEA detection was the most sensitive(expressed in 95,5% of the CRC patients), EGFR is possibly a marker for advanced stage in (expressed in19,3% of the patients and mostly in advanced disease) and CK20 detection corresponded a detection rate of 78,4%.Our results revealed that the increasing number of the transcripts detected in this experimental setting could distinguish certain patient groups having significantly different overall survival. In addition, Spearman’s test revealed a positive correlation of positive detection for all three transcripts in our assay with higher disease stage, preoperative serum CEA levels and higher level of lymph node involvement. Nevertheless our data suggested that our multiplex RT-PCR assay can provide usefull information concerning CRC stage and overall survival.The combination of the mRNA markers in a single reaction could be of clinical value in the early detection of disseminated disease and monitoring of colorectal cancer patients. Further larger-scale studies and longer follow up surveys would prove the clinical significance and prognostic importance of multiplex PCR-based detection of CTCs.

Ο καρκίνος του παχέος εντέρου (ΚΠΕ) αποτελεί μια από τις συχνότερες μορφές καρκίνου στον Δυτικό κόσμο. Παρά τις εξελίξεις στην θεραπευτική αντιμετώπιση της νόσου, τόσο με τη βελτίωση των χειρουργικών τεχνικών όσο και με την εφαρμογή νεότερων προ- και μετεγχειρητικών θεραπειών, η πενταετής επιβίωση κυμαίνεται ευρέως από 90 έως 10% ανάλογα με το στάδιο της νόσου.Η πρόγνωση των ασθενών με ΚΠΕ βασίζεται κυρίως στο στάδιο και την ανατομική έκταση της νόσου όπως αυτά καθορίζονται από το σύστημα ΤΝΜ. Ο ΚΠΕ όμως αποτελεί μια ετερογενή, πολυπαραγοντική, νοσολογική οντότητα και αυτό αποδεικνύεται από το γεγονός ότι όγκοι ίδιου σταδίου όπως και όγκοι ιστολογικά πανομοιότυποι μπορεί να εμφανίζουν διαφορετική πρόγνωση και απάντηση στην θεραπεία.Στο σημείο αυτό φαίνεται πως η μοριακή βιολογία έρχεται να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στον καθορισμό και την εξατομίκευση της πρόγνωσης της νόσου και της ανταπόκρισης στη θεραπεία. Ολοένα και περισσότερα στοιχεία υποστηρίζουν ότι καρκινικά κύτταρα είναι παρόντα στο περιφερικό αίμα ασθενών με συμπαγείς όγκους. Η έγκαιρη ανίχνευση της παρουσίας μικρομεταστάσεων στο περιφερικό αίμα δίνει τη δυνατότητα στην επικουρική θεραπεία να προσφέρει το μέγιστο δυνατό αποτέλεσμα αφού έχει αποδειχτεί ότι η επιτυχία αυτής στηρίζεται στην εκρίζωση της μικρομεταστατικής νόσου πριν την εμφάνιση κλινικά επίσημης μετάστασης. Η τεχνική PCR παρέχει τη δυνατότητα ανίχνευσης καρκινικών κυττάρων σε δείγματα περιφερικού αίματος με μεγάλη αποτελεσματικότητα. Στην παρούσα εργασία μελετήθηκαν τα mRNA τριων καρκινικών δεικτών, του καρκινοεμβρυϊκού αντιγόνου (CEA), της κυτοκερατίνης 20(CK20) και του επιδρεμικού αυξητκού παράγοντα (EGFR). Η multiplex RT-PCR παρέχει τη δυνατότητα ταυτόχρονης ανίχνευσης των δεικτών CEA, CK20 και EGFR στο περιφερικό αίμα ασθενών με ΚΠΕ. Μελετήθηκε η θετική ανίχνευση των δεικτών σε σχέση με τα κλινικά χαρακτηριστικά και την συνολική επιβίωση των ασθενών. Τα ποσοστά των θετικών ανιχνεύσεων των δεικτών στα δείγματα των ασθενών ήταν υψηλότερα σε σχέση με αυτά στα δείγματα των υγιών εθελοντών. Η συσχέτιση του αριθμού των θετικών ανιχνεύσεων τόσο με το στάδιο της νόσου όσο και με τα επίπεδα της πρωτεϊνης CEA του ορρού βρέθηκε να είναι στατιστικώς σημαντική. Η ανάλυση της επιβίωσης ανέδειξε σημαντικές διαφορές στην επιβίωση των διαφορετικών ομάδων των ασθενών όπως αυτές διαμορφώθηκαν με βάση τον αριθμό των θετικών ανιχνεύσεων για τα mRNA των δεικτών CEA, CK20 και EGFR.Το γεγονός αυτό αποδεικνύει ότι η ανίχνευση των mRNA των δεικτών CEA, CK20 και EGFR σε μια και μόνη αντίδραση μέσω της multiplex RT-PCR θα μπορούσε να έχει σημαντική κλινική αξία για την έγκαιρη ανίχνευση υπολειπόμενης νόσου, την εντόπιση των ασθενών με αυξημένη πιθανότητα εμφάνισης υποτροπής και την γενικότερη παρακολούθηση ασθενών με ΚΠΕ.