Inhibition de la double-stranded RNA-dependent Protein Kinase dans la prévention de l'inflammation au cours de la maladie d'Alzheimer.

Introduction : Depuis une dizaine d’années, plusieurs études ont mis en évidence l’activation de la kinase PKR (double-stranded RNA-dependent Protein Kinase) dans les processus de mort cellulaire au cours de la maladie d’Alzheimer (MA). D’abord impliquée dans l’inhibition de la traduction protéique conduisant à l’apoptose, il semble aujourd’hui que PKR activée entre en jeu dans bien d’autres voies de signalisation. En effet, des travaux ont montré que PKR pouvait contrôler l’expression de différents médiateurs inflammatoires via l’activation de la voie NF-κB. Il est également très largement décrit dans la littérature que la composante inflammatoire joue un rôle important dans la physiopathologie de la maladie d’Alzheimer (MA), à travers certains médiateurs comme TNFα, IL-1β et IL-6. Ce processus inflammatoire incontrôlé constitue depuis plusieurs années une cible de recherche importante. En effet réduire la production et la libération des médiateurs inflammatoires pourrait réduire la propagation du message de mort cellulaire et participer à la survie des neurones. Dans ce but, nous avons cherché à mettre en évidence le rôle de PKR dans la réaction inflammatoire au cours de la MA, puis nous avons testé un inhibiteur spécifique de PKR en suivant l’expression des facteurs inflammatoires et des acteurs de la voie NF-κB. Matériel et méthodes : Une première étude a été réalisée sur des co-cultures primaires comprenant neurones (45%), astrocytes (40%) et microglie (15%) dans des proportions physiologiques, traitées par le peptide amyloïde Aβ42 (20µM) avec ou sans pré-traitement par un inhibiteur spécifique de PKR (C16 à 210 nM). Les cytokines (TNFα, IL-1β et IL-6) ont été dosées par ELISA dans des lysats cellulaires. La seconde étude réalisée sur des lymphocytes de patients atteints de la MA remis en culture et traités par le C16 à 1µM, consiste en un dosage des cytokines (TNFα, IL-1α et β, IL-6 et RANTES) produites et libérées, grâce à la technique xMAP®. L’expression de PS32-36IκBα, PS536NF-κB et de la caspase-3 clivée a été analysée par Western Blot. Résultats : Aβ42 augmente significativement le taux des cytokines à 72h, ainsi que l’expression de PS32-36IκBα, PS536NF-κB et induit une activation de la caspase-3. Ces modifications sont prévenues par un pré-traitement au C16 à 210 nM. Ces résultats ont été confirmés sur des lymphocytes de patients atteints de la MA. En effet, le C16 à 1 µM prévient totalement la production des cytokines, exceptée celle de RANTES. L’activation de la voie NF-κB est également prévenue. Conclusion : Ces résultats montrent l’implication de PKR dans l’inflammation au cours de la MA. Une inhibition spécifique de PKR induit une diminution de la production des facteurs inflammatoires via une réduction de l’activation de la voie NF-κB, confirmant que cette kinase constitue une cible très intéressante dans les stratégies thérapeutiques futures de la MA.