Orientador: Aricio Xavier Linhares

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Hoje em dia são reconhecidas muitas espécies de riquétsias pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) e ao Grupo do Tifo (GT), mas os métodos atualmente disponíveis para a identificação de suas espécies têm limitações técnicas. Para detecção preliminar de riquétsias, a prova da hemolinfa...

Resumo: Hoje em dia são reconhecidas muitas espécies de riquétsias pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) e ao Grupo do Tifo (GT), mas os métodos atualmente disponíveis para a identificação de suas espécies têm limitações técnicas. Para detecção preliminar de riquétsias, a prova da hemolinfa é o método mais amplamente usado. A Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) tem sido usada para detectar a presença de riquétsias diretamente de amostras teciduais ou sangüíneas de indivíduos e de artrópodes infectados. No presente trabalho foi utilizada a análise pela PCR para detectar infecção riquétsial do GFM em carrapatos coletados em dois parques urbanos do Município de Campinas, SP e comparada com a prova da hemolinfa. Foram coletados adultos deAmblyomma cooperi em capivaras Hydrochaeris hydrochaeris no Lago do Café, analisados para possível infecção riquetsial pela prova da hemolinfa e posteriormente submetidos à análise pela PCR No Parque Hermógenes Leitão Filho e no Lago do Café foram coletadas, sobre vegetação, ninfas do gênero Amblyomma e adultos de A. cajennenese e A. cooperi, analisados pela PCR com quatro pares de iniciadores. Os resultados indicam a superioridade da PCR sob a prova da hemolinfa para detectar carrapatos infectados com riquétsias com maior sensibilidade, especificidade e facil execução, enquanto que a prova da hemolinfa produz falsos positivos e falsos negativos. Nenhuma amostra foi positiva para o GFM, o que poderia indicar problemas nos iniciadores utilizados e portanto a ocorrência de carrapatos infectados com riquétsias do GFM com PCR negativa para a região de 190 kDa. É necessário desenhar iniciadores a partir de carrapatos brasileiros naturalmente infectados e seqüenciar as amostras positivas, para um melhor entendimento da epidemiologia da Febre Maculosa no Município de Campinas. Palavras-chave: Amblyomma, Rickettsia, Febre Maculosa, PCR,Campinas

Abstract: Presently, several species of Spotted Fever Group (SFG) and Typhus Group rickettsiae are recognized, but the available methods to obtain a more specific identification present technical limitations. The hemolymph test is the method most widely used in preliminary detection of rickettsiae....

Abstract: Presently, several species of Spotted Fever Group (SFG) and Typhus Group rickettsiae are recognized, but the available methods to obtain a more specific identification present technical limitations. The hemolymph test is the method most widely used in preliminary detection of rickettsiae. The Polymerase Chain Reaction (PCR) procedure has been employed to detect rickettsiae direct1y from clinical specimens and infected arthropods. In the present work we apply the PCR method to detect SFG rickettsiae in ticks collected in two locations of the urban area in Campinas City, SP and we compare the results with those obtained via the hemolymph test. Adults of Amblyomma cooperi were collected from capybaras (Hydrochaeris hydrochaens) at "Lago do Café", and analyzed for possible infection with rickettsia using the hemolymph test. After that the collected ticks were processed and submitted to PCR analysis. Nymphs of Amblyomma sp. and adults of A. cajennenese and A. cooperi were collected from vegetation at "Lago do Café" and "Parque Hermógenes Leitão Filho". These nymphs and adults were analyzed using the PCR procedure with 4 primer pairs. The results indicated a higher sensitivity and specificity of the PCR method when compared to the hemolymph test to detect rickettsiae-infected ticks as well as being easier to perform. Moreover, the hemolymph test produces false-positives and false-negatives. Due to the fact that no positive sample was found or the Spotted Fever specific region, it is possible that ticks infected with SFG rickettsiae produced PCR negative for the region of 190 kDa. Therefore, it is necessary to develop primers from naturally infected Brazilian ticks and to sequence the DNA of the rickettsiae found in the positive samples. This is a pre-requisite for a better understanding of the epidemiology of the Brazilian Spotted Fever in Campinas. Key words: Amblyomma, Rickettsia, Spotted Fever, PCR, Campinas