Nutrientes e suplementos nutricionais em vegetais e frutos frequentemente usados na dieta: estudo por espectrometria de massa do resveratrol nas uvas

Abstract

O objectivo deste trabalho centrou-se no estudo com vista à possibilidade de identificação dos locais da uva (pele, polpa e pedúnculos) em que o resveratrol se encontra maioritariamente, através das técnicas analíticas de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa de ionização por electrospray, LC-ESI-MS, e acoplada à espectrometria de massa tandem, LC-ESI-MSn. Para tal, diferentes metodologias de preparação e extracção de amostra foram aplicadas e optimizadas. Além disto, foram também testadas diferentes condições cromatográficas para obter uma boa separação dos constituintes da amostra. Não foi possível identificar o resveratrol mas apenas um dos seus dímeros, para além de vários outros compostos de diferentes subclasses de flavonóides. Adicionalmente, foram estabelecidas vias de fragmentação para este composto, assim como foram determinados os locais de desprotonação energeticamente mais favoráveis utilizando cálculos semi-empíricos. Foi realizado um breve estudo metrológico da curva de calibração do resveratrol para estimar o limite de detecção e de quantificação da componente instrumental.

This work has focused on a study to potentially identify resveratrol in the different parts of grapes (skin, flesh and stems) by analytical methods such as liquid chromatography coupled to mass spectrometry electrospray ionization, LC-ESI-MS, and coupled to tandem mass spectrometry, LC-ESI-MSn. For that purpose, different methods of sample preparation and extraction were applied and optimized. Moreover, different chromatographic conditions were also tested in order to obtain a better separation of the constituents of the sample. Resveratrol has not been identified, except for one of its dimers, besides several other compounds of flavonoids subclasses that were detected and identified. Furthermore, fragmentation pathways were proposed for this compound, and the most probable deprotonation sites were accessed using semi-empirical calculations. A simple metrological analysis of the calibration curve for resveratrol was also done to estimate the limit of detection and the limit of quantification for the instrumental component.